Back to school: Il test immunoenzimatico ELISA

Back to school: Il test immunoenzimatico ELISA

22/10/2013 Off By LabIta
test elisa piastra con marker

una tipica piastra per test ELISA con marker colorati

Il test immunoenzimatico (ELISA) è una tecnica utilizzata per rilevare gli anticorpi o agenti infettivi in un campione . La sigla significa: Enzyme Linked Immunosorbent Assay.

Gli anticorpi sono generati in risposta ad una infezione e quindi un anticorpo ELISA può indicare se un animale è stato in contatto con un certo virus. Un antigene ELISA può dire se un animale è stato infettato da un virus rilevandolo direttamente. I metodi vengono chiamati diretto ed indiretto, a seconda che si leghino all’anticorpo già presente o ad una proteina virale a cui si fa legare un anticorpo di sintesi.

  • Per un anticorpo ELISA (indiretto) , gli antigeni sono posti su una superficie di plastica , viene aggiunto un campione e  gli anticorpi per la malattia per la quale stiamo testando si legano agli antigeni ( Figura 1 ) . Successivamente  viene aggiunto un secondo anticorpo con un marcatore de una reazione positiva viene evidenziata dal cambiamento di colore del marcatore quando viene aggiunto un substrato appropriato. Se non ci sono anticorpi nel campione , il secondo anticorpo non sarà in grado di attaccarsi e non ci sarà alcun cambiamento di colore .
  • Per un antigene ELISA (diretto) , gli anticorpi sono posti su una superficie di plastica , viene aggiunto un campione e , se sono presenti gli antigeni del virus per il quale stiamo testando, si legheranno agli anticorpi . Questo test poi procede nello stesso modo del test con anticorpi ELISA .
elisa diretto elisa indiretto

Schema dei due tipi di test ELISA

Il test ELISA ha un grande spettro di applicazioni nell’ambito della virologia, e può essere eseguito acquistando marker ed antigeni o tramite test in kit specifici per diagnosi di patologie, basati sullo stesso principio ma spesso di facile somministrazione e che non necessitano di piastre o pipette multicanale. Il test “HIV-Ab” per diagnosticare la presenza di anticorpi anti-hiv, è un noto test di tipo ELISA.