La divisione di Microbiologia clinica di Siemens  è leader nell’ identificazione microbica e nei test di sensibilità agli antibiotici . L’azienda opera con un portfolio di oltre 6.000 strumenti e prodotti a livello globale. La linea di prodotti microbiologici comprende gli strumenti MicroScan con i relativi materiali di consumo, insiemme alle soluzioni di gestione dei dati. I sistemi MicroScan sono noti per la precisione e la diagnosi precoce di resistenza agli antibiotici.

Il Presidente di Beckman Coulter diagnostica Arndt Kaldowski ha dichiarato, “Il business della microbiologia clinica sarà un ottimo complemento per la diagnostica di Beckman Coulter con una forte reputazione e un ‘ottima posizione sul mercato. Aggiungendo le sue soluzioni ID / AST ai nostri prodotti e servizi esistenti creerà opportunità per migliorare la nostra offerte ai clienti e migliorare la cura del paziente. L’acquisizione amplia il nostro portafoglio prodotti con sistemi di analisi differenziate che aumentano le nostre capacità cliniche per i clienti. “

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Lanciato da Roche ( Basilea, Svizzera ), e soprannominato il test Elecsys sifilide, integra un saggio Mediace Rapid Plasma ( RPR ) e il saggio latex agglutination per  T. pallidum ( TPLA ) di Roche. Questo test diagnostico immunoenzimatico ha lo scopo di rilevare i pazienti infettati con sifilide nella pratica clinica di routine per assicurarsi che il sangue donato non sia stato infettato. Il saggio dimostra 100 % di sensibilità e una specificità del 99,88 % con perfetta discriminazione dei risultati , eliminando la necessità di una zona grigia , e fornendo fiducia in tutte le fasi dell’ infezione da treponema.

Da oltre 25 anni Roche ha investito nella ricerca e nello sviluppo del settore sierologia in modo  da offrire uno dei più completi portfolio di test per malattie infettive disponibili su un’unica piattaforma automatizzata. Con il nuovo test Elecsys sifilide, la divisione Roche Diagnostics rafforza la sua posizione nel mercato della sierologia e amplia il proprio portfolio immunologico in malattie infettive.

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bioMérieux

Diffusione a livello mondiale della malaria

Il test VIKIA Malaria Ag Pf / Pan è un test a flusso laterale facile da usare che permette alle infezioni malariche di essere rilevate nei campioni di sangue intero in soli 20 minuti , senza la necessità di apparecchiature aggiuntive o formazione specifica . Gli Anticorpi monoclonali hanno come bersaglio gli antigeni HRPII , che sono specifici per P. falciparum ( Pf ) , e Pan ( aldolasi ) , comune a tutte le specie di Plasmodium. Eventuali antigeni presenti nel campione si legano con anticorpi specifici accoppiati a particelle d’oro. Questi complessi migrano lungo la membrana al Pf e / alla lla finestra di risultato del test a flusso capillare, dove sono catturati da anticorpi immobilizzati.

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Schematicamente possiamo ridurre il nostro sistema digerente alle seguenti formazioni: cavità orale, l’istmo delle fauci (la porzione posteriore della cavità orale), la faringe, l’esofago, lo stomaco, l’intestino tenue (duodeno, digiuno e ileo), l’intestino crasso (cieco, colon e retto). Tutte queste formazioni sono disposte nel nostro corpo in ordine discendente dall’alto verso il basso e, in maniera non uniforme, sono popolate da batteri. I batteri, come sappiamo, sono microrganismi unicellulari di dimensioni dell’ordine di pochi micrometri. Alcuni di questi organismi sono fondamentali per l’omeostasi del nostro organismo, altri sono invece potenti patogeni.

La distribuzione batterica varia nel nostro intestino aumentando in senso oro-fecale. Nella regione sovramesocolica del nostro sistema digerente infatti il numero di batteri varia da 10^1 fino a 10^4 per grammo di tessuto. E’ nella regione sottomesocolica, a partire dall’ileo, che il numero di batteri aumenta esponenzialmente fino ad arrivare a 10^11 / 10^12 microrganismi/g nel colon. Questa diversità di concentrazione è giustificata dal cambiamento delle condizioni ambientali interne lungo il tratto digerente. Nel primo tratto digerente infatti esiste una forte concentrazione di acidi (ad esempio acido cloridrico), bile e succo pancreatico elementi sicuramente sfavorevoli alla crescita batterica. Nell’ultimo tratto digerente invece la presenza di tali sostanze è attenuata dal proce(sso di digestione e quindi si può arrivare a contare nelle feci circa 100-200 miliardi di batteri (1). I batteri sono generalmente identificati in latino con due termini, esempio: Staphylococcus epidermidis dove “Staphylococcus” è il genere e “epidermidis” è la specie.

Vediamo quali sono i batteri maggiormente presenti nei vari organi dell’apparato digerente (2):

Stomaco N. di microrganismi presenti: 10^0 – 10^3 CFU/g Genere: Lactobacillus, Streptococcus, Staphylococcus, Enterobatteriaceae, Funghi.

Tratto Duodeno-Digiunale N. di microrganismi presenti: 10^2 – 10^5 CFU/g Genere: Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium, Enterobatteriaceae, Staphylococcus, Funghi

Zona Ileo-ciecale N. di microrganismi presenti: 10^3 – 10^9 CFU/g Genere: Bifidobacterium, Bacteroides, Lactobacillus, Streptococcus, Enterobatteriaceae, Staphylococcus, Colstridium, Funghi

Colon N. di microrganismi presenti: 10^10 – 10^12 CFU/g Genere: Bacteroides, Eubacterium, Clostridium, Peptostreptococcus, Streptococcus, Bifidobacterium, Fusobacterium, Lactobaciullus, Staphylococcus, Funghi.

CFU = Colony Forming Unit, ossia Unità Formanti Colonia per 1 grammo di tessuto.

Quali funzioni assolvono questi migliaia di batteri nell’intestino umano? Essi contribuiscono fortemente alla digestione di carboidrati non facilmente digeribili dall’uomo ma anche di peptidi e proteine così come di sostanze tossiche (es. ammoniaca). Stimolano il sistema immunitario intestinale e svolgono una fondamentale funzione fisica di barriera per evitare la penetrazione e l’invasione dei tessuti da parte di germi patogeni. Alterazioni patologiche di diverso genere possono alterare l’equilibro microbico intestinale e creare danni all’apparato digerente. Alcune forme batteriche presenti nel nostro intestino sono potenzialmente nocive come ad esempio i generi Staphylococcus, Clostridium. Questi microrganismi potrebbero produrre tossine in condizioni patologiche, cosa che in condizioni normali è impedita dalla flora protettiva sulla quale hanno importante ruolo i generi Lactobacillus, Bifidobacterium tra gli altri.

Riferimenti Bibliografici

(1) Guarner F, Malagelada JR. Gut flora in health and disease. Lancet 2003;360:512-9 2 Enzo Ubaldi

(2) L’ecosistema Intestinale e i Probiotici – www.simg.it

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Una delle prime pubblicità per brodo di carne Liebig.

Le origini di terreni di coltura risalgono al 19 ° secolo, quando la scienza della microbiologia era solo all’inizio. L’azienda capostipite, la Liebig Extract of Meat Company ( Lemco ) è stata costituita nel 1865 e ha prodotto estratti di carne con il nome commerciale di Lab Lemco . Oltre ad essere un alimento popolare nato con il nome ‘ estratto di carne Leibig  ’, divenuta in seguito Oxo, si impose subito sul mercato come terreno di coltura batterica. I primi approcci dei ricercatori si basavano sull’utilizzo dello stesso substrato su cui si trovava il batterio, come ad esempio nello studio del 1832 di Bartolomeo Bizio sulle ‘ macchie di sangue”  su ostie causate da Serratia marcescens , in cui venne utilizzato il pane inzuppato come substrato di coltura . Tuttavia, quando si trattava di organismi non pigmentati e agenti patogeni , gli scienziati – primo tra tutti Robert Koch-  hanno cominciato ad utilizzare estratti di carne bovina in maniera stabile.

Substrati solidi:

Nel 1881 Robert Koch dimostrò per la prima volta una nuova tecnica al Congresso Medico Internazionale di Londra. Koch aveva riconosciuto le difficoltà di utilizzo dei media liquidi per l’isolamento di colture pure, e aveva trovato alternative valide nei terreni solidi . Dopo aver testato e valutato terreni di coltura  come albume d’uovo coagulato, pasta di amido e addirittura una fetta di patata tagliata in modo asettico ( la stessa usata dal biologo Schroeter ), concluse che il miglior terreno era rappresentato da un estratto di carne con aggiunta di gelatina . La risultante ”gelatina nutriente” veniva versata su lastre di vetro piane, inoculate e poste sotto una campana di vetro.

Sebbene la “gelatina nutriente” fosse un progresso importante , la gelatina aveva due svantaggi principali come agente gelificante :

• Si trasformava da Gel a Liquido a 25°C – impedendo alle lastre di essere incubate a temperature più elevate .
• Veniva  idrolizzata dalla gelitinase – un enzima prodotto dalla maggior parte dei microrganismi proteolitici .

Fu nel 1882 che Fannie Hesse suggerì di sostituire la gelatina con agar. Fannie, moglie di Walther Hesse, stava lavorando nel laboratorio di Koch come tecnico del marito e aveva precedentemente usato agar per preparare gelatine di frutta dopo aver sentito dellle sue proprietà gelificanti da alcuni amici.

L’agar è un polisaccaride derivato da alghe rosse, che ha dimostrato di essere un agente gelificante superiore a qualsiasi altro. L’ Agar ha inoltre notevoli proprietà fisiche : si scioglie quando viene riscaldato a circa 85 ° C , e ancora una volta raffreddato non torna allo stato di gel fino a 34 – 42°C . L’ Agar è anche più chiaro della gelatina e resiste alla digestione da parte degli enzimi batterici . L’uso di agar permette la creazione di un mezzo che può essere inoculato a 40oC allo stato fuso raffreddato e incubato a 60 ° C senza sciogliersi.

Julius.r. Petri, inventore delle note piastre tonde.

Sebbene l’ estratto di carne fosse una fonte preziosa di numerosi fattori di crescita per i batteri mancava ancora di sufficiente azoto amminico o per consentire la crescita ottimale di numerosi microrganismi. Nel 1884 Fredrick Loeffler aggiunse dunque peptone e sale alla formulazione a  base di estratto di carne di Koch. Il peptone veniva a quell’epoca usato come prodotto farmaceutico, di solito prescritto per i disturbi alimentari.

Nel 1887 Julius Richard Petri, un altro tecnico che lavorava nel laboratorio di Koch, modificò la lastra di vetro piana introducendo un nuovo tipo di piastra di coltura, progettata con un coperchio per tenere all’esterno gli agenti inquinanti, quasi invariata nelle caratteristiche funzionali fino ai giorni nostri.
A partire dal 1890 sono dunque stati sviluppati i terreni di coltura che conosciamo oggi , con piastre di Petri , peptoni e agar.

Substrati selettivi:

I terreni di coltura, tuttavia, non erano ancora in grado di essere discriminanti. Il primo passo verso supporti di diagnostica di questo tipo è stato fatto nel 1888 , da Martinus Beijerinck che sviluppò un substrato selettivo per il batterio Rhizobium, in grado di fissare l’azoto atmosferico, progettando un gel privo di composti azotati, limitando la crescita di sole colonie di batteri azoto-fissatori.

Si sono infine susseguite numerose scoperte chiave nell’ambito della selettività dei terreni di coltura:

1. 1905 : MacConkey usa i sali biliari per selezionare batteri fecali. Il livello di coniugazione nei sali biliari determina il profilo di selettività : sali biliari coniugati sono meno inibitori e permettono la crescita di stafilococchi ed enterococchi , mentre sali più dissociati come desossicolato sono molto più selettivi , consentendo solo la crescita di Enterobacteriacae .
2. 1912 : Churchman mostra che i derivati ​​di trifenilmetano come il violetto di genziana era inibitorio per i batteri Gram positivi.
3. 1923 : Muller sviluppa un substrato con iodio e tiosolfato di sodio che reagiscono insieme per formare tetrationato . La selettività del tetrationato dipende dal fatto o meno un organismo possiede l’enzima tetrationasi. Salmonella e Proteus possiedono l’enzima, così possono crescere in presenza di Tetrationato .

4. 

   Alexander Fleming nel suo laboratorio

   1960: Fleming, Florey e Chain sono stati insigniti del premio Nobel nel 1945 per lo sviluppo della penicillina , ma è solo nel 1960 che gli antibiotici sono utilizzati in terreni di coltura come agenti selettivi . Thayer e Martin realizzano una formulazione per l’isolamento di Neisseria gonorrhoeae e N. meningitidis , con una miscela di vancomicina , colistina e trimetoprim, uno dei primi esempi ben documentati di antibiotici utilizzati in un terreno selettivo.

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